專題突破練11　發(fā)酵工程一、單項(xiàng)選擇題1.(2021山東濟(jì)南章丘二輪階段性測試)下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)技術(shù)的敘述,正確的是(　　)A.加入鏈霉素或者伊紅美蘭的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚酞指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌C.對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時,應(yīng)使用記號筆在皿底標(biāo)記D.利用平板劃線法可對微生物進(jìn)行接種純化、分離和計數(shù)2.(2021山東德州二模)溫泉中含有能夠分解淀粉的耐熱古細(xì)菌,在固體培養(yǎng)基中,該類細(xì)菌分解淀粉會形成透明圈。下圖表示篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌的過程。下列分析正確的是(　　)A.②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選耐熱古細(xì)菌B.配制Ⅰ號培養(yǎng)基時需要加入瓊脂,并且要先滅菌再調(diào)節(jié)pHC.為防止污染,需要對Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌D.從Ⅰ號培養(yǎng)基中選擇透明圈最小的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上3.(2021山東聊城一模)金黃色葡萄球菌是細(xì)菌性肺炎的病原體之一。細(xì)菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素進(jìn)行治療,當(dāng)細(xì)菌出現(xiàn)耐藥性時療效會下降。A、B、C、D四種抗生素均可治療金黃色葡萄球菌引起的肺炎。為選出四種抗生素中療效最佳的一種,研究者分別將含等劑量抗生素A、B、C、D的四張大小相同的濾紙片a、b、c、d置于金黃色葡萄球菌均勻分布的平板培養(yǎng)基上,在適宜條件下培養(yǎng)48h,結(jié)果如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)A.對實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)皿采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B.A、B、C、D四種抗生素中,抑菌效果最佳的是抗生素DC.細(xì)菌出現(xiàn)耐藥性是由于抗生素使細(xì)菌發(fā)生變異D.濾紙片b周圍透明圈中出現(xiàn)一菌落,可能是該菌落發(fā)生了基因突變4.(2021山東濟(jì)南一模)某學(xué)校生物興趣小組利用蘿卜、卷心菜等新鮮蔬菜為材料制作泡菜,并對發(fā)酵過程中乳酸菌、酵母菌細(xì)胞的數(shù)量和pH的變化進(jìn)行了測定,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是(　　) 注logCFU·mL-1是指每毫升菌液可以形成的菌落總數(shù)的對數(shù)值。A.發(fā)酵初期乳酸菌的生長導(dǎo)致發(fā)酵液pH降低,雜菌繁殖受限甚至死亡,乳酸菌逐漸演變?yōu)閮?yōu)勢菌群B.發(fā)酵中期酵母菌主要通過有氧呼吸獲取能量C.統(tǒng)計菌落數(shù)目時,應(yīng)選擇菌落數(shù)為30~300的多個平板計數(shù)并求取平均值D.發(fā)酵過程中壇蓋邊沿的水槽要保持清潔并注滿水,注意經(jīng)常向水槽中補(bǔ)充水5.(2021山東濱州二模)《本草綱目》中記載了釀制燒酒的過程:“用濃酒和糟入甑,蒸令氣上,用器承取滴露。凡酸壞之酒,皆可蒸燒。近時惟以糯米,或粳米,或黍,或秫,或大麥蒸熟,和曲釀甕中七日,以甑蒸取。”下列說法正確的是(　　)A.為使酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵,釀制時“甕”應(yīng)裝滿后密封B.“糯米或粳米”中所含物質(zhì)只能為微生物生長提供碳源和氮源C.在利用酵母菌發(fā)酵的“七日”中,水和酒精是同時產(chǎn)生的D.發(fā)酵過程中密封不嚴(yán),醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)化為乙酸使酒“酸壞”6.(2021山東青島三模)黃酒是中國特產(chǎn),與啤酒、葡萄酒并稱為世界三大古酒。關(guān)于黃酒釀造的“古遺六法”為“秫稻必齊、曲蘗必時、湛熾必潔、水泉必香、陶器必良、火齊必得(注:曲蘗主要指酒曲,湛熾是指浸泡和蒸煮)”。下列敘述錯誤的是(　　)A.黃酒中的酒精是酵母菌利用“秫稻”經(jīng)無氧呼吸產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物B.“曲蘗”制作的溫度不同,可能會影響酵母菌的種類和數(shù)量C.“陶器必良”和“火齊必得”是為了控制發(fā)酵過程的環(huán)境條件D.“湛熾”的目的是滅菌,確保發(fā)酵過程中無雜菌污染7.(2021山東泰安肥城高考適應(yīng)性訓(xùn)練)家庭中制作泡菜的方法:新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后,放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中,然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”,密封后置于溫度適宜的地方。下列與此過程相關(guān)的敘述,錯誤的是(　　)A.用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒B.加入“陳泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌種C.發(fā)酵過程中,乳酸菌與其他雜菌的競爭越來越強(qiáng)D.若制作的泡菜咸而不酸,可能的原因是加入的食鹽過多,抑制了乳酸菌的發(fā)酵二、不定項(xiàng)選擇題8.(2021山東教科所二輪模擬)泡菜是一種傳統(tǒng)美食,其風(fēng)味也因各地做法不同而有異。下圖是制作泡菜的流程圖。下列分析正確的是(　　)A.選擇新鮮的原料可以降低亞硝酸鹽的含量B.配制食鹽水的濃度不宜過高,防止乳酸發(fā)酵受到抑制C.為降低亞硝酸鹽含量,泡菜發(fā)酵的時間越長越好D.泡菜發(fā)酵溫度過高、食鹽用量過低等都容易造成雜菌滋生,使泡菜口感下降9.(2021山東泰安肥城高考適應(yīng)性訓(xùn)練)發(fā)酵工程中選擇優(yōu)良的單一菌種,消滅雜菌是非常重要的工作。篩選微生物的方法包括(　　)A.根據(jù)微生物對碳源需求的差異,使用含有不同碳源的培養(yǎng)基B.根據(jù)微生物對生長因子需求的差異,在培養(yǎng)基中加入不同的生長因子 C.根據(jù)微生物遺傳組成的差異,在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸D.根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異,在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素10.(2021山東泰安肥城高考適應(yīng)性訓(xùn)練)下圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析,下列說法正確的是(　　)A.在用移液管吸取菌液進(jìn)行梯度稀釋時,可用手指輕壓移液管上的橡皮頭,吹吸三次,使菌液與水充分混勻B.對4號試管中的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)必定為5號試管的10倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為1.7×109個D.利用該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計得到的活菌數(shù)目往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低11.(2021山東聊城一模)某種物質(zhì)X(一種含有C、H、O、N的有機(jī)物)難以降解,會對環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解X。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解X的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和X,乙的組分為無機(jī)鹽、水、X和Y。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)A.甲、乙兩培養(yǎng)基均屬于選擇培養(yǎng)基,乙培養(yǎng)基組分中的Y物質(zhì)是瓊脂B.若要篩選能高效降解X的細(xì)菌菌株,則甲、乙兩培養(yǎng)基中X是唯一的碳源C.步驟⑤的篩選過程中,各培養(yǎng)瓶中的X溶液的濃度不同D.步驟⑤的篩選過程中,若培養(yǎng)基中X的濃度過高,則某菌株對X的降解量可能下降12.(2021山東濟(jì)南一模)聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯,它具有類似于合成塑料的理化特性,且廢棄后易被生物降解,可用于制造無污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下所示。下列說法正確的是(　　)A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B.步驟③需要將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) C.步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂,以便挑取單菌落獲得純化菌株D.挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量三、非選擇題13.(2021山東濟(jì)南一模)目前乙醇作為可再生資源中比較理想的液態(tài)燃料正受到人們越來越多的關(guān)注。自然界中可再生的木質(zhì)纖維素資源極為豐富,其主要成分之一是半纖維素。半纖維素容易被酸或者酶水解,其水解產(chǎn)物中的85%~90%為木糖。因此利用木糖發(fā)酵生產(chǎn)乙醇具有重要的應(yīng)用研究價值。酵母菌是傳統(tǒng)的乙醇生產(chǎn)菌株,因其缺乏轉(zhuǎn)化木糖的酶系而不能很好地利用木糖。自然界中某些釀酒酵母能利用木糖進(jìn)行酒精發(fā)酵,某研究小組欲從土壤中分離這種酵母菌并對其產(chǎn)酶活性進(jìn)行測定,實(shí)驗(yàn)基本流程為取土樣→制取土壤懸液→擴(kuò)大培養(yǎng)→選擇培養(yǎng)→菌種分離→酶活性鑒定。請回答下列問題。(1)擴(kuò)大培養(yǎng)可增加　　　　　　,以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物。?(2)分離純化微生物的關(guān)鍵是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。該研究小組將擴(kuò)大培養(yǎng)后的混合菌液適當(dāng)稀釋后接種于　　　　　　　　的選擇培養(yǎng)基上,倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。常用的接種方法有　　　　　　　和　　　　　　　兩種。若劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都長滿了菌落,第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落,則第二劃線區(qū)域第一條線上無菌落的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?(3)為進(jìn)一步確定目的菌株的最佳產(chǎn)酶條件,該研究小組選取培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度、搖床轉(zhuǎn)速以及裝液量四個因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。其中,培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會影響菌株產(chǎn)酶主要是因?yàn)椤　　　　　　　　　　　　　　　　　　?搖床轉(zhuǎn)速因影響　　　　　　　　　　　　而影響菌株產(chǎn)酶。?14.(2021山東青島三模)丁草胺是一種有機(jī)除草劑,主要用于水稻田雜草的防除,具有潛在的致畸變和致突變性。而在水稻種植過程中農(nóng)田有一段很長的淹水期,淹水會導(dǎo)致水稻田深層土壤處于無氧狀態(tài),因此研究丁草胺厭氧降解菌對于水稻田土壤中丁草胺的降解具有重要意義。研究人員對丁草胺厭氧降解菌進(jìn)行了分離、鑒定和擴(kuò)大培養(yǎng)(如下圖所示)。請回答下列問題。(1)你認(rèn)為研究小組應(yīng)該在哪里取樣?　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?(2)配制選擇培養(yǎng)基時,研究人員先加入了K2HPO4、KH2PO4、FeSO4、MgCl2、NH4Cl、CaCl2、NaCl、微量元素復(fù)合液、維生素復(fù)合液等,還需要加入一定量的　　　　　　。對培養(yǎng)基滅菌通常采用　　　　　　　　　法。滅菌結(jié)束后,應(yīng)趁熱將適量培養(yǎng)基分裝于錐形瓶中,充入氮?dú)?塞住膠塞并用鋁帽固定,這樣操作的目的是　　　　　　　　　　　　。若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,則應(yīng)在滅菌　　　　(填“前”或“后”)進(jìn)行。?(3)步驟③中,應(yīng)將平板放入?yún)捬豕拗?置于培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng),對長出的菌落進(jìn)行初步鑒定。菌落是初步區(qū)分微生物類型的重要特征,這些特征包括　　　　　　　　　　　　(至少答出兩點(diǎn))等。?(4)步驟④中,從第二次劃線操作起,每次劃線總是要從上一次劃線的末端開始,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? 專題突破練11　發(fā)酵工程1.C　解析:加入鏈霉素的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基,加入伊紅美蘭的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基,A項(xiàng)錯誤。在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,如果pH升高,指示劑將變紅,說明該細(xì)菌能夠分解尿素,B項(xiàng)錯誤。對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時,為了便于觀察,應(yīng)使用記號筆在皿底標(biāo)記,C項(xiàng)正確。利用平板劃線法可對微生物進(jìn)行接種純化、分離,但不能計數(shù),稀釋涂布平板法可對微生物進(jìn)行接種純化、分離和計數(shù),D項(xiàng)錯誤。2.A　解析:由題圖可知,該平板上形成的單個菌落分布均勻,②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選耐熱古細(xì)菌,A項(xiàng)正確。配制Ⅰ號培養(yǎng)基時要先調(diào)節(jié)pH再滅菌,B項(xiàng)錯誤。為防止污染,需要對Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,對培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌,C項(xiàng)錯誤。在固體培養(yǎng)基中,耐熱古細(xì)菌分解淀粉會形成透明圈,透明圈越大說明其分解淀粉的能力越強(qiáng)。為篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌,應(yīng)從Ⅰ號培養(yǎng)基中選擇透明圈最大的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上,D項(xiàng)錯誤。3.D　解析:要對實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌,A項(xiàng)錯誤。A、B、C、D四種抗生素中,抑菌效果最佳的是抗生素A,B項(xiàng)錯誤。細(xì)菌出現(xiàn)耐藥性是由于抗生素對細(xì)菌的耐藥基因進(jìn)行了選擇,C項(xiàng)錯誤。濾紙片b周圍透明圈中出現(xiàn)一菌落,說明具有耐藥性,可能是該菌落發(fā)生了基因突變,D項(xiàng)正確。4.B　解析:發(fā)酵初期微生物代謝活動導(dǎo)致氧氣減少,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸,導(dǎo)致發(fā)酵液pH降低,使雜菌繁殖受限甚至死亡,乳酸菌逐漸演變?yōu)閮?yōu)勢菌群,A項(xiàng)正確。發(fā)酵初期酵母菌主要通過有氧呼吸獲取能量;發(fā)酵中期為無氧環(huán)境,酵母菌主要通過無氧呼吸獲取能量,B項(xiàng)錯誤。統(tǒng)計菌落數(shù)目時,為保證菌落計數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計數(shù)并求取平均值,C項(xiàng)正確。發(fā)酵過程中壇蓋邊沿的水槽要保持清潔并注滿水,注意經(jīng)常向水槽中補(bǔ)充水,目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境,D項(xiàng)正確。5.D　解析:釀酒時,“翁”應(yīng)留有大約1/3的空間,以利于酵母菌的快速增殖,A項(xiàng)錯誤?！芭疵谆蚓住睘槲⑸锷L提供了碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等,B項(xiàng)錯誤。酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生CO2和H2O,再進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生CO2和酒精,不能同時產(chǎn)生水和酒精,C項(xiàng)錯誤。醋酸菌在有氧條件下會將酒精轉(zhuǎn)化為乙酸,從而使酒“酸壞”,D項(xiàng)正確。6.D　解析:酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精,黃酒中的酒精是酵母菌利用“秫稻”經(jīng)無氧呼吸產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,A項(xiàng)正確?！扒Y”制作的溫度、濕度不同,可能會影響酵母菌的種類和數(shù)量,B項(xiàng)正確?！疤掌鞅亓肌笔菫榱擞辛己玫娜萜鲝亩刂坪冒l(fā)酵過程中的氣體條件,“火齊必得”也是為了控制發(fā)酵過程的環(huán)境條件,C項(xiàng)正確?！罢繜搿钡哪康氖窍?發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生和培養(yǎng)液的酸性環(huán)境會抑制其他雜菌生長,D項(xiàng)錯誤。7.C　解析:制作泡菜時,所用的泡菜壇要用白酒擦拭消毒,防止雜菌污染,A項(xiàng)正確。“陳泡菜水”中含有乳酸菌,因此制作泡菜時,可以加入“陳泡菜水”,以增加乳酸菌的數(shù)量,縮短制作時間,B項(xiàng)正確。由于乳酸菌發(fā)酵過程中的酸性和缺氧環(huán)境不適合大部分雜菌生長,乳酸菌與其他雜菌的競爭越來越弱,C項(xiàng)錯誤。若制作的泡菜咸而不酸,最可能的原因是大量的食鹽抑制了乳酸菌的發(fā)酵過程,乳酸產(chǎn)生減少,D項(xiàng)正確。8.ABD　解析:由于微生物的作用,放置一段時間的原料中亞硝酸鹽的含量會增加,故選擇新鮮的原料可以降低亞硝酸鹽的含量,A項(xiàng)正確。用清水和食鹽配制質(zhì)量分 數(shù)為5%~20%的食鹽水,食鹽水的濃度不宜過高,防止乳酸菌的乳酸發(fā)酵受到抑制,B項(xiàng)正確。發(fā)酵時間過長泡菜的品質(zhì)會降低,所以不是發(fā)酵的時間越長越好,C項(xiàng)錯誤。泡菜發(fā)酵溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短都容易造成雜菌大量滋生,使泡菜口感下降,D項(xiàng)正確。9.ABD　解析:根據(jù)微生物對碳源需求的差異,使用含不同碳源的培養(yǎng)基可以選擇微生物種類,A項(xiàng)符合題意。不同的微生物需要不同的生長因子,可以在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的生長因子進(jìn)行分離,B項(xiàng)符合題意。在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸(DNA和RNA)不會直接影響微生物自身的遺傳組成,即使被微生物利用,也是被分解為核苷酸后利用,所以培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸不會對微生物起選擇作用,C項(xiàng)不符合題意。根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異,在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素屬于選擇培養(yǎng),可對微生物起選擇作用,D項(xiàng)符合題意。10.ACD　解析:在用移液管稀釋菌液時,吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻,防止對后續(xù)的稀釋過程造成影響,A項(xiàng)正確。對4號試管中的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),稀釋倍數(shù)比5號試管的低10倍,如果稀釋適當(dāng),得到的菌落平均數(shù)可能是5號試管的10倍,B項(xiàng)錯誤。由題圖可知,菌液一共稀釋了1×106倍,每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109(個),C項(xiàng)正確。利用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)可能存在兩個或多個細(xì)菌細(xì)胞連在一起成為一個菌落的情況,使統(tǒng)計得到的活菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目要低,D項(xiàng)正確。11.ABD　解析:甲、乙兩培養(yǎng)基均以X為唯一碳源和氮源,屬于選擇培養(yǎng)基,其中乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,因此Y物質(zhì)是瓊脂,A項(xiàng)正確。若要篩選能高效降解X的細(xì)菌菌株,則甲、乙兩培養(yǎng)基中X是唯一的碳源,B項(xiàng)正確。步驟⑤中的自變量是挑取的不同的菌落,各培養(yǎng)瓶中的X溶液的濃度應(yīng)該是一致的,因?yàn)閄溶液的濃度屬于無關(guān)變量,C項(xiàng)錯誤。步驟⑤的篩選過程中,若培養(yǎng)基中X的濃度過高,可能會導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞失水過多而失活,因此該菌株對X的降解量可能下降,D項(xiàng)正確。12.BD　解析:PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯,要篩選嗜鹽細(xì)菌,步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上,A項(xiàng)錯誤。步驟③為防止皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基造成污染,需要將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng),B項(xiàng)正確。步驟④擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基中不應(yīng)加入瓊脂,C項(xiàng)錯誤。要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯(PHA)的嗜鹽細(xì)菌,挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量,最后進(jìn)行比較,D項(xiàng)正確。13.答案(1)目的菌株數(shù)量(2)將聚集的菌種逐步稀釋分散,以得到由單個細(xì)胞增殖而形成的單個菌落　以木糖為唯一碳源　平板劃線法　稀釋涂布平板法　接種環(huán)灼燒滅菌后未冷卻即進(jìn)行劃線操作、未從上次劃線末端開始劃線(3)培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會影響酶活性　溶解氧量、菌種獲取營養(yǎng)物質(zhì)的概率14.答案(1)施用過丁草胺的水稻田深層土壤(2)丁草胺　高壓蒸汽滅菌　創(chuàng)造無氧的培養(yǎng)環(huán)境　前(3)形狀、大小、顏色、隆起程度、邊緣特征等(4)劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,從上一次劃線的末端開始劃線,能使細(xì)菌的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落解析:(1)施用過丁草胺的水稻田中能夠分解丁草胺的菌株數(shù)量多,易獲得目的菌株,同時由于目的菌株是厭氧微生物,故獲取分離目的菌的土壤樣品應(yīng)從施用過丁草胺 的水稻田深層土壤中獲取。(2)配制培養(yǎng)基時除微生物生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)外,還需加入一定量的丁草胺。培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。滅菌后的培養(yǎng)基趁熱充氮的目的是去除培養(yǎng)基中的氧氣,創(chuàng)造無氧環(huán)境。培養(yǎng)基的pH要在滅菌前調(diào)節(jié)適當(dāng)。(3)菌落的特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度、顏色、邊緣特征、光澤等。(4)劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,從上一次劃線的末端開始劃線,能使細(xì)菌的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。